伊丽莎白眼看自己的心上人被表亲夺走，她嫉恨异常。她要做十足的女王，因此也甘愿做十足的处女。走了罗伯特，她又召来新的美男子在自己的周围侍候，先后当她的宠臣和情人的有华尔特·罗利和埃塞克斯伯爵等。她依旧蹉跎她的岁月，但日月无情，年华易逝，女王很快过了中年到了暮年。个人爱情上的不幸，使她在暮年时性格变得异常多疑、怪僻，她不与四周人接近，精神萎靡，政治上也没有当年开明了，变得独断专横。并且，她的身体也急剧衰弱下去。1603年3月24日，伊丽莎白一世以老处女终其一生，享年七十岁，在位四十五年。
伊丽莎白无嗣，英国都铎王朝结束。英国大臣和国会领袖协议，迎立与英国君主有血缘关系的玛丽女王的儿子、苏格兰国王詹姆士六世为英国国王，是为英国的詹姆士一世，从此开创了英国的斯图亚特王朝，并打下了英格兰和苏格兰合并的基础。
为了王位，伊丽莎白抛弃了爱情，但她死后英国王冠却落到了自己的政敌玛丽女王的儿子头上。这和她原来的意志是背道而驰的，但这无意间却为英格兰和苏格兰的合并提供了一个偶然的机缘。这也是伊丽莎白万万没有料到的。当然，伊丽莎白生前的所作所为，对英国历史还是产生过深远的影响的。莎士比亚、培根等伟人都在伊丽莎白时代开始崭露头角，在他们的作品中都反映过、歌颂过伊丽莎白时代。英国的贵族对她更是念念不忘。索耳兹伯里勋爵说：“英国以有伊丽莎白而引以自豪”。